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離子色譜柱,我們首先就要做一下這個
離子色譜柱的柱效。下面我將從幾個問題來探討關于柱效的一些事。
離子色譜柱是指色譜柱保留某一化合物而不使其擴散的能力。柱效能是一支色譜柱得到窄譜帶和改善分離的相對能力。
柱效,從名字上理解是色譜柱的分離效果。色譜柱的有效塔板數(shù)越大或有效的塔板高度越低,色譜柱的柱效越好,類似于每個塔板的分離效率相同,有效塔板數(shù)越多,zui終得到的質越純。
柱效率是指溶質通過色譜柱之后其區(qū)域寬度增加了多少,它與溶質在兩相中的擴散及傳質情況有關,這是所謂色譜的動力學過程。
柱效下降會有什么現(xiàn)象?
1.看峰分離度,分離度直接關系測試結果準確性,可以判斷柱效是否下降,柱效下降分離度一般會變差。
2. 測定色譜柱的塔板數(shù)來判斷
3.通過壓力變化和出峰時間來判斷,一般柱效下降時伴隨著柱壓的升高和降低,此時出峰的時間也會和之前有很大差異。
4.還可以根據(jù)新的柱子的保留時間判斷,看重復性,平行性如何.
5. 通過譜圖峰型的變化,是否有嚴重前伸和拖尾現(xiàn)象,如果峰型很差了,柱效已經下降了
柱效下降后如何來提高柱效:
離子色譜柱柱長時間在緩沖溶液中使用和進樣,將導致色譜柱離子交換能力下降,.用稀酸緩沖溶液沖洗可以使陽離子柱再生,反之,用稀堿緩沖溶液沖洗可以使陰離子柱再生.
另外,還可以選擇能溶解柱內污染物的溶劑為流動相做正方向和反方向沖洗.但再生后的色譜柱柱效是不可能恢復到新柱的水平的.
如果柱子裝反了,可以調回來,但可能會造成柱內擔體塌陷.在不得已的情況下盡量不要反裝色譜柱.